GenMute™ siRNA Transfection Reagent

GenMute™ siRNA Transfection Reagent 产品型号：SL100568

GenMute试剂是一种新型可生物降解的非脂质体siRNA/miRNA & DNA递送工具。用我们专有的pH依赖性构象变化(PDCC)技术中，可生物降解的转染剂是通过向其侧链添加预先筛选的疏水基团来配制的GenMute试剂是功能多样且强大的基因传递工具。GenMute试剂已经被证实能有效地和可重复地转染单个siRNA/miRNA或共转染DNA/siRNA或DNA/miRNA到多种哺乳动物细胞。

大小和内容:
- GenMute试剂，1.0 mL，足以在24孔板中转染5.0 pmol siRNA或miRNA模拟物进行约2000次反应。
- GenMute转染缓冲液(5x)，用于最大转染效率，8.0 mL制成40 mL工作溶液。

应用:
-对多种哺乳动物细胞的单siRNA转染或DNA/siRNA共转染。
-单一miRNA、miRNA模拟物或抑制剂转染或DNA/miRNA或DNA/miRNA模拟物共转染至多种哺乳动物细胞。

存储:
在4°C下储存GenMute 试剂和RT用于GenMute转染缓冲液(5x)。如果储存得当，该产品可稳定储存12个月或更长时间。

优势:
-仅用1.0 nM siRNA / miRNA模拟物，在低浓度下具有优异的沉默效果
-最小化细胞中的非特异性和脱靶效应
-单管反应
-适合广泛的哺乳动物细胞
-极低的细胞毒性
-非常实惠

GenMute siRNA & DNA转染剂与品牌产品的沉默效果比较

GenMute转染剂(上图)与dharma fect 4 siRNA转染剂(中图)的敲除功效比较以及HEK293细胞上的Lipofectamine 2000(下图)。按照制造商的方案，通过上述三种转染试剂，将靶向0.5-20nm不同终浓度的海肾萤光素酶的siRNA与海肾萤光素酶基因(每孔0.5g pRL-CMV DNA)共转染到生长在24孔板中的HEK293细胞中。 用海肾萤光素酶测定系统(Promega)在共转染后24小时测定海肾萤光素酶活性。用光度计(Beckman Coulter LD 400)在10s积分期间从5.0 l裂解物测量发光。荧光素酶活性为 表示为10s内积分的光单位(RLU ),并通过使用BCA分析标准化为每毫克细胞蛋白。误差条代表从三次实验中得出的标准偏差。相对于未处理的细胞计算荧光素酶沉默效率。在…期间 GenMute和dharma fect 4试剂使1.0 nM的海肾荧光素酶siRNA李产生显著的基因沉默pofectamine 2000仅在30纳米后产生良好的敲除(数据未显示)。


在HEK293细胞中用0.5升GenMu对内源性表达的KIF11(也称为Eg5)进行出色的沉默24孔板的每个孔中含有te试剂和5.0 pmol Eg5 siRNA。 KIF11(也称为Eg5)编码 一种运动蛋白，属于 驱动蛋白样蛋白家族参与细胞有丝分裂期间染色体定位和双极纺锤体形成。KIF11水平的降低导致有丝分裂停滞。与阴性对照(最终10 nM)相比，GenMute试剂以每孔仅0.5 l的量有效地将Eg5 siRNA(最终10 nM，右图)递送至HEK293细胞。左侧面板)。与阴性对照(左图)相比，转染后24小时(右图)用尼康显微镜观察到“聚集"293细胞的表型。


GenMute转染试剂敲低了Hela细胞中内源性层粘连蛋白A/C基因的表达。 通过以下方式将靶向核纤层蛋白A/C基因的siRNA(右图)和假siRNA(左图)导入Hela细胞(最终1.0 nM) GenMute转染试剂。L通过免疫荧光在转染后24小时监测amin A/C基因沉默。用小鼠单克隆核纤层蛋白A/C特异性抗体探测核纤层蛋白A/C，然后加入FITC缀合的抗小鼠抗体。定量分析表明由GenMute转染试剂递送的1.0 nM的核纤层蛋白siRNA敲除了Hela细胞中94%的内源性表达的核纤层蛋白A/C。

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GenMute™ siRNA Transfection Reagent 产品型号：SL100568