如何改善组织学切片中的核染色？

希望改善组织切片中的细胞核染色？我们可以帮忙！组织学标本通常需要细胞核和组织的其他细胞成分之间的明显区别，以给病理学家提供最佳的诊断外观。苏木精一种碱性染料，将细胞核染色，使其呈现蓝色到紫色。曙红将粉红色调添加到细胞质中，将红色调添加到血细胞中，从而产生对比鲜明的蓝紫色和粉红色阴影，这在标本的细胞结构中是截然不同的。

对于使用组织学标本的常规诊断，使用苏木精和伊红(H&E)染色是目前观察细胞结构细节的方法。因为这种染色显示了如此广泛的细胞质、细胞核和细胞外基质特征，实验室技术人员能够控制嗜碱性染色的外观和强度，以满足病理学家的期望。主要有两种类型:Harris H&E，一种回归技术，和Gill的H&E，一种渐进技术。这篇文章讨论了如何改善每种技术的嗜碱性核染色。

Harris  H&E染色:嗜碱性染色太弱
哈里斯苏木精是一种回归染色技术，因此组织切片首先用苏木精过度染色以产生蓝色细胞核，然后在分化步骤中在弱酸酒精中去除多余的染料。

当苏木精的颜色太弱或标本暴露在苏木精中的时间不够长时，H&E染色中的弱嗜碱性核染色就会发生。以下是我们推荐的解决方案:

1. 苏木精中的暴露时间太有限:

   为了解决曝光时间，调整载玻片在苏木精染色溶液中的时间长度，直到您看到所需的染色强度。

2. 苏木精的pH值超出范围:

   为了解决苏木精被稀释超过pH值5-6的理想范围的问题，在染色过程中尽量减少水分带入苏木精溶液。

3. 水的pH值超出范围:

   染色前检查水的pH值，如果可能，用去离子水或蒸馏水代替自来水。这可以解决水中含有太多氯的问题，氯可以作为漂白剂；减弱苏木精染色。

4. 弱溶液渗透:

   对于石蜡包埋标本上的H&E染色，如果嗜碱性染色太浅，有可能石蜡没有全从组织切片中溶解出来。如果组织切片中有蜡，水基染色液不能适当渗透标本，导致染色弱。将载玻片放回新鲜二甲苯中，去除切片中的石蜡，然后继续对组织标本进行重新染色。

5. 不良固定或组织处理:

   弱嗜碱性染色的另一个原因是不良的固定或处理。这意味着染色剂不会与组织结合；这是准备纸巾的问题。

6. 酸性酒精浓度过高:

   如果酸性醇的浓度对于分化步骤来说太强，或者如果样本在酸性醇中花费了太多时间，这种回归染色技术可能导致太多的染料被去除。通过选择较低浓度的酸性酒精溶液(即从1%变为0.5%溶液)或减少样品在溶液中的时间来解决这一问题。

Gill’s H&E染色:嗜碱性染色太弱
吉尔苏木精是一种进行性染色。将染色剂施用于组织切片，而不需要在区分剂(通常为酸性醇)中进行后续步骤，以去除过量的嗜碱性染色剂。

1. 苏木精中的曝光时间太有限:要解决曝光时间，调整载玻片在苏木精染色中的时间长度，直到您看到所需的染色强度。
2. 苏木精的pH值超出范围:为了解决苏木精被稀释超过pH值5-6的理想范围的问题，在染色过程中，尽量减少水分带入苏木精溶液。
3. 水的pH值超出范围:在染色前检查水的pH值，如果可能，用去离子水或蒸馏水代替自来水。这可以解决水中含有太多氯的问题，氯可以作为漂白剂，可以减弱苏木精染色。
4. 弱溶液渗透:对于石蜡包埋标本上的H&E染色，如果嗜碱性染色太浅，有可能石蜡没有全从组织切片中溶解出来。如果组织切片中有蜡，水基染色液不能适当渗透标本，导致染色弱。将载玻片放回新鲜的二甲苯中，去除切片中的石蜡，然后继续对组织标本进行重新染色。
5. 固定或处理不良:弱嗜碱性染色的另一个原因是固定或处理不良。这意味着染色剂不会与组织结合；这是准备纸巾的问题。