谷胱甘肽(GSH,g-谷氨酰半胱氨酰甘氨酸)是需氧生物体中主要的非蛋白质巯基,在大多数细胞中合成。普遍存在的三肽是由谷氨酸和半胱氨酸在 g-谷氨酰半胱氨酰合成酶的催化下结合形成的。然后通过谷胱甘肽合成酶添加甘氨酸以形成 GSH。 除了在氢过氧化物还原为相应的醇(或过氧化氢的情况下为水)的过程中提供电子外,GSH 还在谷胱甘肽 S-转移酶催化的异生物质代谢中充当共底物。它也是几种参与细胞内运输的代谢酶的辅助因子,具有抗氧化剂和辐射防护剂的作用,并促进蛋白质折叠和降解。
测试原理
NWLSS™ 谷胱甘肽测定是 Tietze 描述的方法的改进。通用硫醇试剂5-5'-二硫代双[2-硝基苯甲酸](DTNB,埃尔曼试剂)与GSH反应形成412 nm发色团5-硫代硝基苯甲酸(TNB)和GS-TNB。随后 GS-TNB 被谷胱甘肽还原酶和 β-烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸 (NADPH) 还原,释放出第二个 TMB 分子并回收 GSH;从而放大响应。最初存在于反应混合物中或由 GSH 与 GS-TNB 的混合二硫化物反应形成的任何 GSSG 会迅速还原为 GSH,并在测定中可检测到。
一种基于速率的动力学测定法,用于定量各种样品(包括血液、血浆、组织和培养细胞)中的还原型谷胱甘肽 (GSH) 和氧化型总谷胱甘肽 (GSH)。该试剂盒还适用于清除还原型谷胱甘肽后测量氧化型谷胱甘肽 (GSSG)。
NWLSS™ 谷胱甘肽 (GSH GSSG) 检测的优点:
出色的灵敏度低至 5 pMol
当样品用合适的硫醇清除剂(例如 4乙烯基吡啶 (4VP) 或 NEM)预处理时,可以检测谷胱甘肽二硫化物 (GSSG)
目录编号: | NWK-GSH01 |
格式: | 192 项测试以 2 X 96 孔微量滴定板检测形式呈现。还提供用于分光光度计的比色皿格式。 |
样品要求: | 全血、血浆、组织和细胞裂解物。 |
特异性: | 总谷胱甘肽(GSH 加 GSSG) |
灵敏度: | 使用标准方法为 0.1 µM(适用于全血和某些组织类型)。使用改良的高灵敏度方法为 0.005 µM(适用于血浆中 GSH 水平较低的样品,或用于清除还原的 GSH 后检测 GSSG)。联系 NWLSS 了解详情。 |
有可能的使用: | 总 GSH 的定量测量(还原型加氧化形式) |
储存和稳定性: | 如果储存在 2-8C 下,自生产之日起 12 个月 |
套件内容: | DTNB 试剂 NADPH NADPH 稀释剂 GR 酶 GSH (GSSG) 校准剂 测定 缓冲液 |
仅供研究使用