储存
冻干肽应储存在阴凉、避光、干燥的地方。为了获得最佳保存效果,请将肽储存在 -20°C 或更低的温度下,并远离强光。大多数在此温度下储存的肽将保持稳定数年。
吸收水分会大大降低肽的稳定性,并可能降低总肽含量。含有肽的小瓶在打开之前应先升温至室温。这将减少固体肽的冷表面或容器内部从空气中吸收水分。取出所需数量后,应尽快重新密封小瓶,最好在干燥氮气气氛下,然后将其放回冷藏室。
溶液中含有 Met、Cys 或 Trp 残基的肽的保质期因氧化而受到限制。为了避免重复冻融循环,建议将储备溶液分成等份。如果绝对无法避免在溶液中储存肽,请使用 pH 5-6 的无菌缓冲液,并在 -20°C 下储存等分试样,以延长溶液中肽的储存期限。溶解度肽的溶解度取决于序列。溶解肽可能很困难,特别是当肽非常疏水时。一般来说,尝试将肽溶解在无菌蒸馏水中。如果肽仍然不溶,请尝试以下步骤:
超声处理可能会有所帮助,因为它可以提高溶解速度。
碱性肽添加10%乙酸或0.1% TFA;对于酸性肽,使用 1% 氢氧化铵或 10% 碳酸氢铵进一步超声处理可提高溶解度。
对于仍然不溶的肽,添加有机溶剂,例如乙腈、DMSO 或 DMF,浓度高达 20% (v/v)。请注意,这些溶剂可能会干扰某些生物测定。对于具有二级结构的肽,可能需要添加离液剂,例如尿素或盐酸胍。