磁珠的使用技巧

纯化是大多数分子生物学实验中的常见程序，例如去除 PCR 反应中的短引物、未掺入的 dNTP、酶和盐以及其他杂质。纯化方法有多种，包括过滤、离心和分离。分离已成为生命科学中非常流行的方法，并使用各种类型的固相支持物。这包括琼脂糖珠、琼脂糖珠、二氧化硅珠和磁珠。使用磁珠分离是所有磁珠分离方法中最快、最干净且有效的技术。

磁珠可以涂有针对抗原、抗体、蛋白质或核酸的特异性亲和配体。将磁珠与样品一起孵育后，对磁珠（和附着的生物分子）施加磁力，以将磁珠收集成浓缩颗粒。分离完成后，可以轻松去除上清液，并且可以从磁珠上洗脱与珠子结合的生物分子。

使用磁力操纵磁珠的能力使得洗涤步骤比使用琼脂糖、琼脂糖凝胶或硅珠更容易和更快。纯化的产物还可以使用磁力分离方法以更浓缩的形式回收。

以下是给新用户的一些提示：

1.       重悬珠子

磁珠需要有足够的磁性含量，以便可以通过磁铁简单地下拉。传统磁珠的尺寸超过 1 µm (1 µm = 1000nm)。较新的珠子尺寸更小（低至数百纳米），以增加珠子表面积。这导致结合能力增加并改善分散性。磁珠是由氧化铁组成的重颗粒，因此它们会随着时间的推移而沉淀。珠子的尺寸越大，沉淀得越快。使用前涡旋并重悬磁珠非常重要，以重新分散磁珠并确保等分试样之间的一致性。

2.       清洗珠子

增加洗涤步骤的数量有助于减少与磁珠的非特异性结合。用乙醇（用于核酸纯化）或洗涤缓冲液洗涤磁珠时，请使用足够的洗涤溶液覆盖沉淀。

3.       了解珠子的特性

磁珠有不同的尺寸、形状、磁响应、涂层、缓冲条件和附着的官能团。这些变量影响珠子的特性。获取珠子的基本信息对于更好地了解如何处理它们非常重要。

4.       捕获珠子

一般来说，磁珠会被磁铁吸引并在一分钟内形成颗粒。延长磁珠对磁铁的吸引力，以确保所有磁珠均被回收。

5.       去除洗涤液时不要扰动珠粒

去除洗涤液或上清液时，倾斜移液器吸头，使吸头不接触磁珠沉淀。这可以防止珠子与上清液重新混合。使用具有倾斜侧面的磁力架，使珠粒集中在管壁的一侧。这使得去除上清液变得更加容易。