定量蛋白质印迹介绍

定量蛋白质印迹使不同治疗之间的相对比较成为可能。定量蛋白质印迹的目标是准确测量蛋白质表达的变化。

改变生活的疗法。农作物产量增加。我们所有人都希望通过我们一生的工作做出改变。定量西部片可以成为推进发现并使世界变得更美好的强大工具。

科学出版商、资助机构以及生物技术和制药公司对定量蛋白质印迹感兴趣。近年来，发表蛋白质印迹的期刊标准变得更加严格。5 , 6 , 7 , 8 , 9 了解西方人的理论和技术对于获得准确的蛋白质定量非常重要。有了更多可信的数据，我们就能为未来奠定坚实的基础。

• 信号与加载的蛋白质量成正比。

• 感兴趣的蛋白质（或“目标"）在检测的线性范围内进行定量。

• 内部上样控制可纠正样品制备、上样和转移过程中不可避免的变化。

除了这些要求外，实验变异性还应保持较低，以便可实现复制。

对于定量分析，您必须验证几个条件。条带强度的差异可能是由实验变异性（如使用不同的抗体或阻断剂）或真正的生物学变化引起的。在设计实验之前，确定蛋白质印迹过程中变异的来源以及如何最好地控制它们非常重要。

您的结论将始终基于（并受到）实验中的变异量的影响。您可以使用 CV（变异系数）、σ（标准差）、r 2（决定系数）或其他全方式来定义或测量变异性。减少变异性是最大限度提高精度的关键。

确定实验结果的重要性是定量西方学者普遍关心的问题。一种方法是定义已处理和未处理样本之间频带信号的百分比变化。实验变化需要大于您对变异性的测量，例如 CV。因此，为了对微小的变化更有信心，请降低实验中的 CV。说起来容易做起来难，对吧？为了始终如一地获得准确的答案，请尽可能消除错误源。