EvaGreen® 基于染料的 qPCR 预混液 介绍

特征：

• EvaGreen® Dye – 信号比 SYBR® Green 更好，更安全、更环保

• Cheetah™ Hotstart Taq – 在 95°C 下两分钟后全激活，以实现快速循环方案

• 配备 2 色跟踪系统，有助于发现移液错误，节省时间、试剂、DNA 样本和 $$$

• 可以不使用 ROX 被动染料，使用单独的 ROX 管，或与 ROX 预混合（高浓度或低浓度）

我们的Forget-Me-Not™ EvaGreen® qPCR 主混合物是热启动 EvaGreen® 基于染料的主混合物，用于实时 PCR 应用和 DNA 熔解曲线分析。这些预混液可代替任何 SYBR® Green 染料基预混液。 Forget-Me-Not™ EvaGreen® qPCR 主混合物含有低浓度的惰性蓝色染料，使您可以轻松看到含有主混合物的孔。

主混合物可不含 ROX 被动染料，带有单独的 ROX 管，或与 ROX 预混合（高浓度或低浓度）。试剂盒配有 2 色跟踪系统，其中包括 DNA 模板缓冲液（一种深蓝色染料），当与模板混合时，添加模板后会将反应从浅蓝色变为深蓝色（图 1，左）。 2 色跟踪系统可以防止移液错误，避免浪费时间、试剂和珍贵的 DNA 样本。

EvaGreen® 染料
一种 DNA 结合染料，具有非常适合 qPCR 和高分辨率 Melting® (HRM) 分析*的功能。 EvaGreen® 染料通过新颖的“按需释放"机制与 dsDNA 结合，允许在 qPCR 中使用相对较高的染料浓度，而不会产生 PCR 抑制（Mao, et al. 2007. BMC Biotech. 7, 76-91） 。

EvaGreen® 染料的其安全性非常好。 DNA 结合染料本质上是危险的，因为它们有可能引起突变。考虑到这一点，Biotium 的科学家设计了 EvaGreen® 染料，使其无法穿过细胞膜，从而防止染料与活细胞中的基因组 DNA 接触。所有其他商业 PCR 染料只需几分钟即可进入细胞。例如，SYBR® Green I 已被证明比溴化乙锭（一种的诱变剂）具有更大的环境毒性（Ohta, et al. 2001. Mut. Res. 492, 91-97）。独立实验室已证实 EvaGreen 染料不会导致突变、无细胞毒性，并且对水生生物来说是安全的，可以直接丢弃在排水沟中。

基于 EvaGreen® 的预混液的另一个好处是，您可以通过凝胶电泳分析 PCR 产物，而无需在上样缓冲液或凝胶中添加另一种 DNA 结合染料。主混合物中的 EvaGreen® 染料可充当 DNA 预染色剂，允许在电泳后直接观察 DNA 带。

Cheetah™ HotStart Taq
Cheetah™ HotStart Taq DNA 聚合酶是 Biotium 专有的化学修饰热启动 DNA 聚合酶。 Cheetah™ Taq 在室温下全失活，在 95°C 2 分钟后全激活，使其特别适合快速循环 PCR 方案。

qPCR 预混液