HTRF 高范围胰岛素测定显示与人胰岛上清液中的 RIA 具有好的相关性。回归线的斜率为 0.9，接近理想线，证明了测定的可靠性。
对小鼠和大鼠 B 细胞的验证:将 MIN6 小鼠 ß-细胞和 INS-1E 大鼠 ß-细胞接种到 24 孔板中（500 µL 培养基中，每孔 400,000 个细胞），然后在 37°C - 5% CO2 的全培养基中培养 6 天。刺激前，用 KRB 缓冲液洗涤细胞，并在 KRB 缓冲液（不含葡萄糖）中于 37°C 进行细胞静止步骤 2 小时。用 250 µL 含有浓度不断增加的葡萄糖的 KRB 缓冲溶液刺激细胞。MIN6 细胞分泌 10 分钟和 30 分钟后，或 INS-1E 细胞分泌 2 小时后，收集细胞上清液*并使用 HTRF 检测试剂对胰岛素进行定量。每个处理条件一式三份进行测量（误差线代表SEM）。
大鼠胰岛验证:将雄性 Wistar 大鼠新鲜分离的胰岛在含有 2.8 mM 葡萄糖（非刺激性基础条件）或 8.3 mM 葡萄糖（刺激性条件）的 KRB 缓冲液中于 37°C 孵育 30 分钟（5 个胰岛/管；4 管/健康）状况）。孵育期结束时，收集上清液*并使用胰岛素高范围试剂盒测定胰岛素浓度。
* 样品由法国蒙彼利埃大学糖尿病药理学实验室、Max Mousseron 生物分子研究所 (IBMM)、CNRS UMR-5247 药学院慷慨提供
对离体灌注大鼠胰腺的验证:用含有 1.5 g/L 葡萄糖 +/- 10 µM 槲皮素的 KRB 缓冲液灌注从雄性 Wistar 大鼠中分离的胰腺。向培养基中连续通入 95% O2 ± 5% CO2 并保持在 37.5°C。选择恒定压力以提供 2.5 至 3.3 mL/min 之间的流速。随着时间的推移收集流出液*（13 个部分），并使用试剂盒试剂测量胰岛素浓度。
* 样品由法国蒙彼利埃大学糖尿病药理学实验室、Max Mousseron 生物分子研究所 (IBMM)、CNRS UMR-5247 药学院慷慨提供
对人类胰岛的验证:将来自 3 个人胰腺（A、B 和 C）的胰岛置于 24 孔板中（50 个胰岛/孔，3 孔/条件），并在含有 2.8 mM 葡萄糖的 KRBH 缓冲液中于 37°C 预孵育 1 小时。孵育延长一小时并收集上清液以测量基础胰岛素分泌。接下来用 16.7 mM 葡萄糖在 37°C 下刺激胰岛 1 小时，然后收集上清液以测量葡萄糖刺激的胰岛素分泌。然后用酸-乙醇溶液裂解胰岛24小时，收集裂解物并离心。使用胰岛素高范围试剂盒试剂对上清液*和裂解物*中的胰岛素进行定量。
* 样本是在法国蒙彼利埃大学医院再生医学和生物治疗研究所 (IRMB) 糖尿病细胞治疗实验室生成的。
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