细胞分选试剂配置涉及到一系列用于细胞分选和分离的试剂和缓冲液,包括常用的试剂和其配制方法。
缓冲液的配制:
磷酸盐缓冲液(PBS):
配方:137 mM NaCl、2.7 mM KCl、10 mM Na2HPO4、1.8 mM KH2PO4。
将上述化合物按照配方称取后,加入适量的去离子水溶解,并用盐酸或氢氧化钠调节 pH 值至7.4,最后用去离子水定容至适量。
细胞培养基:
细胞培养基的配方视实验需求而定,可以选择 DMEM、RPMI-1640、MEM 等常用培养基。根据厂家提供的配方,按比例混合培养基粉末与适量的去离子水,并用 pH 调节剂调节 pH 值至适宜范围,最后用去离子水定容至适量。
标记抗体的配制:
标记抗体通常需要进行稀释或标记染料。具体的配制方法会根据抗体或染料的性质有所不同。大多数情况下,抗体或染料会附带说明书,其中包含了建议的稀释比例和基本的标记方法。根据说明书的建议进行稀释和标记即可。
细胞溶解液和洗涤缓冲液的配制:
细胞溶解液:
细胞溶解液的配制方法因实验目的而异。常见的细胞裂解液包括 RIPA 缓冲液、NP-40 缓冲液、细胞裂解液等。可以根据实验要求和相关文献提供的方法进行配制。
洗涤缓冲液:
洗涤缓冲液用于洗涤分选后的细胞,以去除残留的细胞培养基、血清等。常用的洗涤缓冲液是 PBS 或 TBS 缓冲液。也可以根据实验要求和相关文献提供的方法进行配制。
紧密联结试剂配制:
紧密联结试剂(例如 DAPI)用于染色并识别细胞核。具体的配制方法会根据试剂的性质有所不同,通常会附带说明书,其中包含了建议的稀释比例和使用方法。根据说明书的建议进行稀释即可。