用于小鼠的 mNSET 设备 60010 非手术胚胎移植说明

处理

设备仅限一次性使用。使用后丢弃。

在 mNSET 胚胎移植之前

为了生产用于移植的小鼠胚胎和作为受体的假孕雌性，使用了标准的转基因方法。¹按照标准的转基因程序与雄性和雌性小鼠交配。如果需要，女性捐赠者可以进行超数排卵。胚胎在 EmbryoMax® KSOM 培养基 (Millipore#MR-106-D) 或所需培养基中孵育。胚胎应在 mNSET 转移当天交配后 3.5 天（3.5 dpc）；受体雌性小鼠在 mNSET 转移当天应为 2.5 dpc。

mNSET 演示视频

快速程序和完整程序演示视频可在此处查看和下载。快速程序视频演示了使用 mNSET™（非手术胚胎和精子移植）小鼠 60010 设备如何轻松完成小鼠子宫胚胎移植。完整程序视频详细介绍了整个设置和准备，直至实际程序结束.

胚胎移植程序

1. 将 15μl 培养基滴到 60 mm 组织培养皿（Falcon 353002 或类似物）的盖子上。

2. 使用标准胚胎处理移液器将 12–20 个囊胚装入培养基中。 （注意：要移植的胚胎的最佳数量将根据小鼠品系和胚胎接受的操作而有所不同。）

3. 将 mNSET 设备放在已设置为 1.8μl 的 P-2 移液器上。（推荐的移液器是移液器Rainin Classic PR2，0.1-2μl或Gilson Pipetman P2，0.2-2μl。

4.按下移液器柱塞到第一停止，将mNSET装置的下端放入培养基中，然后慢慢将胚胎拉入下端。从介质中取出 mNSET 设备下端。

5.小心地将移液器设置为2.0μl，以在mNSET下端产生一个小气泡，以帮助确保胚胎在插入鼠标期间留在设备下端内。轻轻地将装有吸头的移液器放在一边（靠近笼子），以便在步骤#9中使用。避免推挤 mNSET 下端。

6.将未麻醉的受体雌性放在带有金属架的笼子顶部，让鼠标“抓住"笼子杆表面。用拇指和食指抓住尾巴的根部，将尾巴向上倾斜，同时用手的另一边轻轻按压尾巴的根部。（见下图。